嘔吐毒素免疫親和柱是如何進(jìn)行樣品處理的？

更新時(shí)間：2022-11-30

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　　嘔吐毒素，又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，多分布于小麥、大麥、玉米等谷物籽實(shí)中, 對(duì)人體有一定危害作用，歐盟分類標(biāo)準(zhǔn)為三級(jí)致癌物。嘔吐毒素免疫親和柱通過嘔吐毒素抗原與抗體的特異性結(jié)合，將毒素從樣本中選擇性分離，從而達(dá)到凈化的效果。那么對(duì)于嘔吐毒素免疫親和柱的樣品是如何進(jìn)行處理的呢？下面我們來詳細(xì)了解下！

　　嘔吐毒素免疫親和柱的樣品處理：

　　方法一：酒類

　　取脫氣的酒類樣品加入聚乙二醇8000，用PBS緩沖液定容；高速均質(zhì)；用快速定性濾紙過濾，收集濾液；再用微纖維濾紙過濾，并收集濾液作為上樣液；取上樣液過免疫親和柱凈化。

　　稀釋倍數(shù)：2

　　方法二：醬油、醋、醬及醬制品；

　　取樣品，加入聚乙二醇8000，用PBS緩沖液定容；高速均質(zhì)；用快速定性濾紙過濾，收集濾液；再用微纖維濾紙過濾，并收集濾液作為上樣液；取上樣液過免疫親和柱凈化。

　　稀釋倍數(shù)：2

　　方法三：糧食及飼料

　　1.玉米、小麥、面粉、配合飼料、濃縮料、精補(bǔ)料等吸水性較小的樣本；

　　稱取粉碎樣品，聚乙二醇8000，加入蒸餾水；高速均質(zhì)；用快速定性濾紙過濾，收集濾液；再用微纖維濾紙過濾，并收集濾液作為上樣液；取上樣液過免疫親和柱凈化。

　　稀釋倍數(shù)：2

　　2.麩皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性較強(qiáng)的樣本；

　　稱取樣品，聚乙二醇8000，加入蒸餾水；高速均質(zhì)；用快速定性濾紙過濾，收集濾液；再用微纖維濾紙過濾，并收集濾液作為上樣液；取上樣液過免疫親和柱凈化。

　　稀釋倍數(shù)：2

　　注意事項(xiàng)：

　　1.使用前，免疫親和柱需回至室溫(22～25℃)。

　　2.親和柱2～8℃儲(chǔ)存，不得凍存。

　　3.不要使用過了有效日期的免疫親和柱。

　　4.取樣量：根據(jù)需要可以適當(dāng)增加或減少取樣量，注意提取液量要相應(yīng)改變。

　　5.pH：親和柱的上樣溶液pH需在6～8之間，若偏離此范圍需要用鹽酸或*調(diào)節(jié)pH。

　　6.由于樣本中嘔吐毒素的含量普遍較高，如果計(jì)算后樣本含量大于4mg/kg時(shí)，表示已經(jīng)超過親和柱柱容量，需要適當(dāng)降低上樣液的體積，重新檢測。

　　7.上機(jī)檢測時(shí)的溶劑與流動(dòng)相保持一致可以消除溶劑效應(yīng)的影響。

　　8.嘔吐毒素可致癌，應(yīng)戴手套操作。

　　9.使用過的容器及標(biāo)準(zhǔn)品溶液最好用次氯酸鈉溶液(5%V/V)浸泡過夜。